【灭菌前:别让菌菌嘲笑你】
1. 加水玄学
实验室祖传规矩:只加蒸馏水! 自来水的水垢能让灭菌锅折寿三年,老师骂人超凶。
水位加到“安全线”就停手,多了会喷蒸汽,少了会干烧——别问为什么懂,都是教训。
2. 包装禁忌
培养基试管:盖子拧松1/4圈!不然灭菌时气压差能给你表演“试管炸裂烟花秀”。
移液枪头盒:用锡箔纸包好再灭菌,否则塑料盒变形直接报废(别心疼,哭过)。
液体灭菌:瓶口封透气膜!没膜?用牛皮纸+橡皮筋捆扎,别用Parafilm密封(会炸瓶!)。
3. 摆锅秘诀
液体放下层,固体堆上层——否则上层冷凝水下流,你的固体培养基秒变“水帘洞”。
别塞满! 留1/3空间给蒸汽流动,否则角落里的物品可能灭菌失败长杂菌(别赌运气)。
【灭菌中:手别抖,稳住!】
1. 参数选择
常规操作:121℃×20分钟(培养基、器械、枪头)。
含糖培养基:115℃×20分钟!高温会让糖焦化变褐(别让培养基看起来像奶茶)。
灭菌袋上的化学指示条变黑才算成功,没变色?重灭! 否则杂菌party欢迎你。
2. 排冷空气
手动灭菌锅:先开排气阀,等喷出持续蒸汽再关阀(冷空气排不净,温度上不去)。
自动灭菌锅:选“液体模式”会帮你慢排气,固体模式直接排气可能让液体沸腾(别手贱选错)。
3. 保命操作
戴双层手套!取灭菌锅时外层手套沾水导热超快,别等手烫出水泡才后悔。
灭菌时远离锅体正面,蒸汽喷出能烫熟猪皮(别问我怎么知道的)。
【灭菌后:防翻车终极奥义】
1. 开门时机
压力表归零后,再等10分钟! 80℃开锅可能导致玻璃瓶炸裂(别贪快,安全第一)。
液体培养基:静置过夜再摇动,否则沉淀物混匀后可能凝固不彻底(别让培养基结块)。
2. 存储骚操作
灭菌后的培养基:趁热倒平板?No! 等冷却到50℃再倒,否则冷凝水多到能养鱼。
枪头/器械:灭菌后烘干再密封,潮湿环境下容易长霉菌(别让耗材变成霉菌培养基地)。
3. 翻车自查
灭菌后培养基浑浊?→ 可能灭菌不彻底或你忘记拧松试管盖(常见作死行为)。
固体培养基不凝固?→ 可能灭菌时高温破坏琼脂(改用115℃灭菌试试)。
翻车案例
案例1:某同学用密封罐灭玻璃珠,开锅时“嘭”一声,珠子射穿天花板(实验室至今有弹孔)。
案例2:灭完液体忘记关火,锅底水烧干,整个实验室弥漫烤铁板味(维修费扣光补助金)。
记住:灭菌不规范,菌菌两行泪!