微藻是水中微小的“绿色工厂”,研究它们需要先让这些活泼的小生命“安静”下来,固定在载玻片上,才能用显微镜观察它们的形态和结构。这个过程就像给微藻拍一张清晰的“证件照”。以下是具体操作步骤和注意事项,简单易懂,一起学起来!
一、主要操作步骤
1. 取样——找到目标微藻
用干净的采样瓶(或试管)采集水样,避免污染。如果是培养的微藻,可直接用移液枪吸取少量样本。
2. 固定——让微藻“定住不动”
根据微藻类型选择固定剂(常用福尔马林或卢戈氏碘液):
– 福尔马林:1-4%浓度,每10毫升水样加1-2滴,摇晃混匀。
– 卢戈氏碘液:直接滴入水样至颜色变浅棕色(微藻被染色并固定)。
静置10-30分钟,让微藻沉淀到容器底部。
3. 清洗——去除多余化学试剂
用吸管吸去上层液体,加入少量清水轻轻冲洗沉淀的微藻,重复2-3次(避免冲散样本)。
4. 制片——把微藻“粘”在玻片上
– 用吸管吸取沉淀的微藻,滴1-2滴在载玻片中央。
– 盖上盖玻片(从一侧缓慢放下,避免产生气泡)。
– 若样本太稀,可自然晾干几秒后再盖片。
5. 镜检——显微镜下的“微世界”
– 将载玻片放在显微镜载物台上,先用低倍物镜(如10×)找到目标区域。
– 切换高倍物镜(如40×)观察细节,调节细准焦螺旋使图像清晰。
– 拍照或记录观察到的微藻形态(如形状、颜色、结构)。
二、注意事项——安全又高效
1. 安全第一!
– 福尔马林、戊二醛等有刺激性,需戴手套和口罩,在通风处操作。
– 废液勿直接倒入下水道,需收集后按实验室规范处理。
2. 固定时间别太久
– 福尔马林固定超过1小时可能使细胞变形,及时清洗或观察。
– 卢戈氏碘液染色后需尽快观察,避免褪色。
3. 浓度要精准
– 固定剂浓度过高会破坏细胞,过低则固定不彻底。
– 新手建议先用低浓度(如1%福尔马林),逐步调整。
4. 样本别太密或太稀
– 微藻密度过高时,可用清水稀释;过稀则需离心浓缩。
5. 盖玻片要轻拿轻放
– 气泡会影响观察,盖片时倾斜45°缓慢贴合液体。
6. 显微镜使用小技巧
– 高倍镜下勿用粗准焦螺旋,避免压碎玻片。
– 光线调至柔和(太亮会过曝,太暗看不清)。
三、为什么需要固定微藻?
微藻在水中会游动或漂浮,直接观察可能模糊不清。固定后不仅能“定格”它们的形态,还能杀死微生物,方便长期保存样本。比如:
– 福尔马林适合保存细胞结构;
– 卢戈氏碘液能同时染色淀粉等结构,让细胞更清晰。
微藻固定镜检就像给这些“微观小精灵”按下暂停键,帮助科学家看清它们的真面目。只需按步骤操作,注意安全细节,你也能轻松探索水中的奇妙世界!如果第一次失败,别气馁——多练习几次,就能拍出微藻的“完美证件照”啦!